Concentration par la loi de Beer-Lambert
Calculateur
Résultats
- Concentration (µmol/L)
- 72.347266
- Concentration (mmol/L)
- 0.072347
- Concentration (nmol/L)
- 72,347.266881
Résultats de biologie et laboratoire
| Concentration (µmol/L) | 72.347266 |
| Concentration (mmol/L) | 0.072347 |
| Concentration (nmol/L) | 72,347.266881 |
Diagramme formula-map
- Concentration (µmol/L)
- 72.347266
- Concentration (mmol/L)
- 0.072347
- Concentration (nmol/L)
- 72,347.266881
Décomposition de la formule
Formule
c = A ÷ (ε × l)= 72.347266881029
Note
Modèle simplifié : ces résultats utilisent les relations de laboratoire classiques et des constantes moyennes (A260 = 1 pour 50 µg/mL d'ADN double brin, 617,96 g/mol par paire de bases, ~110 Da par acide aminé, croissance exponentielle idéale). Les échantillons réels varient selon la pureté, les contaminants, le tampon, la température et l'étalonnage de l'appareil. Vérifiez toujours avec vos propres étalons et votre protocole ; ne pas utiliser pour un usage diagnostique ou critique pour la sécurité.
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Voir tout →Questions fréquentes
Qu'est-ce que la loi de Beer-Lambert et que signifie chaque terme ?+
Elle stipule que l'absorbance A est égale au coefficient d'extinction molaire (ε) multiplié par le trajet optique (l) multiplié par la concentration (c) : A = εlc. L'absorbance est sans unité, ε s'exprime en M⁻¹cm⁻¹, le trajet optique est généralement en centimètres, et la concentration ressort en molaire.
Comment résoudre la concentration avec ce calculateur ?+
En réarrangeant la loi, on obtient c = A / (ε x l), donc vous saisissez l'absorbance mesurée, le coefficient d'extinction connu de votre composé à cette longueur d'onde, et le trajet optique de la cuve, et le calculateur renvoie la concentration.
Pourquoi le trajet optique importe-t-il, et puis-je l'ignorer ?+
Le trajet optique n'est pas négligeable car le doubler double l'absorbance pour une même concentration ; les cuves standards font 1 cm, ce qui simplifie la formule, mais il faut tout de même le saisir correctement si vous utilisez une cuve de taille différente, comme un trajet de 0,1 cm en microvolume.
Pourquoi mon absorbance mesurée n'est-elle pas proportionnelle à la concentration à valeurs élevées ?+
La loi de Beer-Lambert n'est linéaire que sur une plage d'absorbance limitée, généralement jusqu'à environ 1,0 à 2,0 unités d'absorbance ; à des concentrations plus élevées, la lumière parasite et les interactions moléculaires provoquent des écarts, donc les échantillons dépassant cette plage doivent être dilués avant la mesure.
Où trouver le coefficient d'extinction de mon composé ?+
Il est spécifique à chaque composé et longueur d'onde, et se trouve généralement dans la littérature, un certificat d'analyse du réactif, ou calculé à partir du spectre d'absorptivité molaire connu du composé ; utiliser le coefficient de la mauvaise longueur d'onde est une source d'erreur fréquente.