Concentración por la ley de Beer-Lambert
Calculadora
Resultados
- Concentración (µmol/L)
- 72.347266
- Concentración (mmol/L)
- 0.072347
- Concentración (nmol/L)
- 72,347.266881
Resultados de biología y laboratorio
| Concentración (µmol/L) | 72.347266 |
| Concentración (mmol/L) | 0.072347 |
| Concentración (nmol/L) | 72,347.266881 |
Diagrama formula-map
- Concentración (µmol/L)
- 72.347266
- Concentración (mmol/L)
- 0.072347
- Concentración (nmol/L)
- 72,347.266881
Desglose de la fórmula
Fórmula
c = A ÷ (ε × l)= 72.347266881029
Nota
Modelo simplificado: estos resultados usan las relaciones de laboratorio estándar y constantes promedio (A260 = 1 para 50 µg/mL de ADN bicatenario, 617,96 g/mol por par de bases, ~110 Da por aminoácido, crecimiento exponencial ideal). Las muestras reales varían según la pureza, los contaminantes, el tampón, la temperatura y la calibración del instrumento. Verifique siempre con sus propios estándares y protocolo; no lo use con fines diagnósticos ni críticos para la seguridad.
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¿Qué es la ley de Beer-Lambert y qué significa cada término?+
Establece que la absorbancia A es igual al coeficiente de extinción molar (ε) por el paso óptico (l) por la concentración (c): A = εlc. La absorbancia no tiene unidades, ε se expresa en M⁻¹cm⁻¹, el paso óptico suele estar en centímetros, y la concentración resulta en molar.
¿Cómo resuelvo la concentración con esta calculadora?+
Reordenando la ley se obtiene c = A / (ε x l), así que introduces la absorbancia medida, el coeficiente de extinción conocido de tu compuesto a esa longitud de onda, y el paso óptico de la cubeta, y la calculadora devuelve la concentración.
¿Por qué importa el paso óptico, y puedo omitirlo?+
El paso óptico no se puede ignorar porque duplicarlo duplica la absorbancia para la misma concentración; las cubetas estándar miden 1 cm, lo que simplifica la fórmula, pero aun así hay que introducirlo correctamente si usas una cubeta de otro tamaño, como un paso de 0,1 cm en microvolumen.
¿Por qué mi absorbancia medida no es proporcional a la concentración en valores altos?+
La ley de Beer-Lambert solo es lineal en un rango de absorbancia limitado, típicamente hasta unas 1,0 a 2,0 unidades de absorbancia; a concentraciones más altas, la luz parásita y las interacciones moleculares provocan desviaciones, así que las muestras que superen ese rango deben diluirse antes de la medición.
¿Dónde encuentro el coeficiente de extinción de mi compuesto?+
Es específico de cada compuesto y longitud de onda, y suele encontrarse en la bibliografía, en el certificado de análisis del reactivo, o calcularse a partir del espectro de absortividad molar conocido del compuesto; usar el coeficiente de la longitud de onda equivocada es una fuente común de error.